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HILIC模式,大極性化合物的克星

更新時間:2025-12-10 點擊次數(shù):306

工作中你是否會遇到一些C18柱難以保留的化合物?在前述文章中我們說到,部分不保留化合物可以通過加入離液劑來增加保留,但是離液劑也有一些無法解決的情況;我們可以通過離子對試劑來增加保留,但會改性色譜柱導致不可逆的損傷;還可以通過混合模式來保留,但色譜柱重現(xiàn)性相對不是很好……

那么,Hilic模式(hydrophilic interaction chromatography,親水作用液相色譜)將是一個不錯的選擇。

Hilic模式是正交于反相與正相體系的一種模式,其固定相為極性,流動相則與反相系統(tǒng)相同;主要通過液液分配、吸附作用、離子作用、親水作用等多種復雜的作用模式來讓極性化合物保留,而并非單一的保留機制(反相體系主導作用力為疏水作用力);極性化合物的保留及峰形同樣取決于流動相的組成(pH、有機溶劑)及固定相的種類。在Hilic模式中,乙腈為弱洗脫溶劑,水是強洗脫溶劑,與正相類似,但為了區(qū)別,所以Hilic模式又稱反反相。

在分離時,流動相中的極性溶劑在固定相表面形成一層極性層,而極性化合物由于液液分配等作用也會更傾向于極性層中而得以保留,因此極性溶劑在Hilic模式的流動相中添加量通常為3%--40%,低于3%則無法在固定相表面形成極性層,高于40%(有時可到50%)則會破壞這一分配平衡變?yōu)槌R?guī)的反相模式。

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